整形美容用重組人源化膠原蛋白注射材料在我國屬于第三類醫(yī)療器械注冊產(chǎn)品，分類編碼13-09-02。適用于美容腔的注射。
一、產(chǎn)品技術(shù)要求應(yīng)包含的技術(shù)指標(biāo)：
整形美容用重組人源化膠原蛋白注射材料建議考慮的性能項(xiàng)目如下表所示：
序號 | 建議的性能研究項(xiàng)目 | 是否列入產(chǎn)品技術(shù)要求 | 是否列入性能研究資料 | 是否列入貨架有效期驗(yàn)證 | 備注 |
重組人源化膠原蛋白性能 |
一般性要求 |
1. | 外觀（包括可見異物） | 是 | / | 是 | / |
2. | 裝量-上限及下限 | 是 | / | 是 | / |
3. | 體外降解-上限及下限 | / | 是 | / | / |
4. | 無菌 | 是 | / | 是 | / |
物理性能要求 |
5. | 水溶解性/鹽溶解性 | 是 | 是 | / | / |
6. | 滲透壓摩爾濃度-上限及下限 | 是 | 是 | 是 |
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7. | 動力黏度-上限及下限 | 是 | 是 | 是 | 適用于凝膠類產(chǎn)品 |
8. | 推擠力-上限及下限 | 是 | 是 | 是 | / |
9. | 熱穩(wěn)定性 | / | 是 | 是 |
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10. | 纖維質(zhì)量/多孔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu) | / | 是 | 是 | / |
化學(xué)性能要求—鑒別及成分定量 |
11. | 總蛋白含量-上限及下限 | 是 | 是 | 是 | / |
12. | 純度-下限 | 是 | 是 | 是 | / |
13. | 藥物等有效成分的含量-上限及下限 | 是 | 是 | 是 | 適用于添加藥物等有效成分的產(chǎn)品 |
14. | 分子量 | 是 | 是 | 是 | / |
15. | 等電點(diǎn) | 是 | 是 | 是 | / |
16. | 氨基酸序列確認(rèn) | / | 是 | / | / |
17. | 肽段覆蓋率（氨基酸序列覆蓋度） | / | 是 | / | / |
18. | 末端氨基酸序列 | / | 是 | / | / |
19. | 肽圖 | / | 是 | / | / |
20. | 巰基和二硫鍵 | / | 是 | / | 若基因序列存在半胱氨酸殘基時 |
21. | 消光系數(shù) | / | 是 | / | / |
22. | 電泳圖型 | / | 是 | 是 | / |
23. | 液相層析圖譜 | / | 是 | / | / |
化學(xué)性能要求—結(jié)構(gòu)表征 |
24. | 氨基酸異質(zhì)性分析 | 脫酰胺化、氧化、糖譜/糖基化修飾等 | / | 是 | / | / |
25. | 脯氨酸羥基化 | / | 是 | / |
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26. | 高級結(jié)構(gòu)分析 | 圓二色（CD）光譜 | / | 是 | 是 |
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27. | 微量差示掃描量熱譜 | / | 是 | 是 |
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28. | 紅外光譜 | / | 是 | 是 |
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29. | 拉曼光譜 | / | 是 | 是 |
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化學(xué)性能要求—雜質(zhì)控制相關(guān) |
30. | 重金屬總量-上限 | 是 | 是 | / | / |
31. | 微量元素-上限 | 是 | 是 | / | 砷（As）、汞（Hg）、鉛（Pb）、鉻（Cr）、鎘（Cd）、銅（Cu）、鉬（Mo）、鐵（Fe）、鎳（Ni） |
32. | 細(xì)菌內(nèi)毒素-上限 | / | 是 | / | / |
33. | 外源性DNA殘留量-上限 | 是 | 是 | / |
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34. | 大腸桿菌蛋白質(zhì)殘留量-上限 | 是 | 是 | / | 適用于大腸桿菌發(fā)酵制備的重組膠原 |
35. | 酵母蛋白質(zhì)殘留量-上限 | 是 | 是 | / | 適用于酵母發(fā)酵制備的重組膠原 |
36. | CHO細(xì)胞蛋白質(zhì)殘留量-上限 | 是 | 是 | / | / |
37. | 殘余抗生素含量-上限 | 是 | 是 | / | / |
38. | 殘余抗生素活性 | 是 | 是 | / | / |
39. | 肽聚糖 | 是 | 是 | / | 若重組人源化膠原蛋白的生產(chǎn)過程有可能引入肽聚糖（促炎性污染物）的風(fēng)險 |
40. | 碳水化合物結(jié)構(gòu) | / | 是 | / | / |
41. | 水分-上限 | 是 | 是 | 是 | 適用于凍干粉等成品中無水的產(chǎn)品 |
42. | 熾灼殘渣-上限 | 是 | 是 | 是 |
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43. | 酸堿度 | 是 | 是 | 是 | / |
44. | 有害小分子物質(zhì)及添加劑殘留量-上限 | 是 | 是 | / | 結(jié)合產(chǎn)品生產(chǎn)工藝、有害小分子物質(zhì)的人體可耐受水平綜合考慮。 |
45. | 分子變異體 | / | 是 | / |
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產(chǎn)品特定功能 |
46. | 評價細(xì)胞-膠原蛋白相互作用 | / | 是 | / |
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注射針部件性能 |
47. | 注射針理化性能 | 是 | 是 | / | 按照GB15811制訂，若注射針已批準(zhǔn)上市則無需制定EO殘留量。 |
注射器部件性能 |
48. | 注射器外觀 | 是 | / | 是 | 該項(xiàng)目可合并到凝膠外觀中，潤滑劑不適用于終產(chǎn)品，塑流不適用于玻璃注射器。 |
49. | 刻度 | 是 | / | / | / |
50. | 無泄漏（注射器與注射針、活塞與外套之間） | 是 | 是 | 是 | 終產(chǎn)品推注及抽吸時，施加側(cè)向力及軸向力于芯桿和/或外套。 |
51. | 活塞與外套的配合性 | 是 | 是 | 是 | 目力觀察終產(chǎn)品豎直正置和倒置后，活塞組件的移動程度 |
52. | 活塞與芯桿的配合 | 是 | 是 | 是 | 終產(chǎn)品抽吸時活塞是/與芯桿分離 |
53. | 魯爾接頭 | / | 是 | / | 按照GB15810，適用于空注射器 |
54. | 器身密合性 | / | 是 | / | 按照GB15810，適用于空注射器 |
55. | 活塞與推桿的配合性 | / | 是 | / | 按照GB15810，適用于空注射器 |
56. | 外套與活塞組件的配合 | / | 是 | / | 按照GB15810，適用于空注射器 |
二、醫(yī)療器械注冊單元劃分
申報產(chǎn)品的注冊單元劃分原則上應(yīng)符合《醫(yī)療器械注冊單元劃分指導(dǎo)原則》的要求，著重考慮產(chǎn)品的技術(shù)原理、結(jié)構(gòu)組成、性能指標(biāo)及適用范圍等因素?？煽紤]劃分為不同注冊單元的情況舉例：
（1）不同的重組人源化膠原蛋白型別。
（2）不同的重組人源化膠原蛋白氨基酸序列。
（3）不同的注射材料劑型，如溶液、凍干粉、凝膠等。
（4）膠原蛋白結(jié)構(gòu)等材料特征不同而導(dǎo)致產(chǎn)品性能指標(biāo)差異較大時，建議劃分為不同的注冊單元。
三、生物學(xué)特性研究
根據(jù)YY/T 0316《醫(yī)療器械 風(fēng)險管理對醫(yī)療器械的應(yīng)用》描述的風(fēng)險管理過程進(jìn)行生物學(xué)風(fēng)險評定，識別材料/添加劑/加工助劑和其他潛在可瀝濾物中的危害、接觸劑量等因素，繪制基于風(fēng)險管理的生物學(xué)評價流程圖。
整形美容用重組人源化膠原蛋白注射材料類產(chǎn)品屬于與組織持久接觸的植入性醫(yī)療器械，需參照GB/T 16886《醫(yī)療器械生物學(xué)評價》進(jìn)行生物學(xué)評價，需考慮的生物相容性風(fēng)險包括但不限于：細(xì)胞毒性、遲發(fā)型超敏反應(yīng)、皮內(nèi)反應(yīng)、遺傳毒性、皮下植入反應(yīng)、急性全身毒性、亞慢性毒性、材料介導(dǎo)的致熱性（可提供原材料及終產(chǎn)品的化學(xué)表征、毒理學(xué)風(fēng)險評估等評價資料，證明申報產(chǎn)品不含已知致熱性物質(zhì)；如果評價過程中發(fā)現(xiàn)含有引起過致熱性反應(yīng)的物質(zhì)和/或未知其致熱潛能的新化學(xué)成分或物質(zhì)，需要對該成分或物質(zhì)的致熱性進(jìn)行進(jìn)一步評價，或者對終產(chǎn)品進(jìn)行熱原試驗(yàn)）。
若已對人源化膠原蛋白原材料進(jìn)行過充分的生物相容性研究，可提供原材料與終產(chǎn)品在生物學(xué)風(fēng)險影響因素方面的差異分析（如加工工藝、無菌控制方法等方面），并提供膠原蛋白原材料的生物學(xué)試驗(yàn)資料，評估豁免生物學(xué)試驗(yàn)的可行性。
四、生物安全性研究
基于目前科學(xué)認(rèn)知水平，重組人源化膠原蛋白病毒傳播的風(fēng)險較低，生物安全性主要關(guān)注免疫原性安全性研究。需要注意的是，用傳統(tǒng)免疫原性試驗(yàn)方法來評價重組人源化膠原蛋白往往有困難。例如由于高度的種屬特異性，由基因工程技術(shù)所制備的蛋白質(zhì)或肽類往往會在人體以外的其它宿主中產(chǎn)生免疫應(yīng)答，其生物學(xué)效應(yīng)有所改變，并可能形成免疫復(fù)合物而導(dǎo)致有毒性反應(yīng)，從而出現(xiàn)與人體安全性無關(guān)的反應(yīng)結(jié)果。
（1）免疫毒理學(xué)評價
當(dāng)產(chǎn)品的免疫原性風(fēng)險與已上市產(chǎn)品無可比性，且無充分的文獻(xiàn)、數(shù)據(jù)評價其免疫原性，需進(jìn)行免疫毒理學(xué)試驗(yàn)研究。通過免疫毒理學(xué)試驗(yàn)，對炎癥反應(yīng)、免疫抑制、免疫刺激、超敏反應(yīng)以及自身免疫進(jìn)行評價，評估免疫系統(tǒng)改變導(dǎo)致的潛在人體不良事件。
免疫毒理學(xué)可通過流式細(xì)胞術(shù)（FCM）、酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）、組織病理切片等方法測定，試驗(yàn)方法可考慮結(jié)合生物學(xué)試驗(yàn)、體外T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)等，申請人應(yīng)對選用檢測方法的適用性進(jìn)行評價，采用非標(biāo)方法時應(yīng)進(jìn)行方法學(xué)驗(yàn)證?？蓞⒖糋B/T 16886.20《醫(yī)療器械免疫毒理學(xué)試驗(yàn)原則和方法》選擇進(jìn)行功能性或非功能性免疫毒理學(xué)試驗(yàn)。
若用動物進(jìn)行免疫學(xué)試驗(yàn)，可能因?yàn)閯游锬Ｐ团c人體臨床應(yīng)用之間的種屬差異，帶來試驗(yàn)數(shù)據(jù)及結(jié)果的局限性，宜對人體臨床評價獲得的免疫學(xué)評價數(shù)據(jù)及動物模型獲得的免疫評價數(shù)據(jù)進(jìn)綜合評價分析。
（2）免疫原控制及免疫化學(xué)檢驗(yàn)
為降低免疫原性風(fēng)險，在產(chǎn)品設(shè)計及生產(chǎn)工藝中一般需采取相應(yīng)風(fēng)險控制措施，包括宿主細(xì)胞選擇，蛋白提取、蛋白純化等過程。申請人需明確產(chǎn)品的制備工藝，提供涉及產(chǎn)品免疫原性/免疫反應(yīng)的風(fēng)險分析及控制工藝的描述和驗(yàn)證性資料。申請人需對重組人源化膠原蛋白類終產(chǎn)品中可致免疫原性的各種物質(zhì)的殘留量進(jìn)行測試，提供相關(guān)研究資料。
五、滅菌工藝研究
明確滅菌工藝（方法和參數(shù)）和無菌保證水平（SAL），提供滅菌確認(rèn)報告。若終產(chǎn)品不能耐受終端滅菌工藝，需提供依據(jù)及不能耐受的驗(yàn)證資料。如滅菌使用的方法容易出現(xiàn)相關(guān)衍生物的殘留，需明確殘留物信息及采取的處理方法，并提供研究資料。
六、動物試驗(yàn)研究
參照《醫(yī)療器械動物試驗(yàn)研究注冊審查指導(dǎo)原則 第一部分：決策原則》確定是否需要進(jìn)行動物試驗(yàn)。
對于經(jīng)決策需開展動物試驗(yàn)的，參照《醫(yī)療器械動物試驗(yàn)研究注冊審查指導(dǎo)原則 第二部分：試驗(yàn)設(shè)計、實(shí)施質(zhì)量保證》設(shè)計并開展動物試驗(yàn)，提供規(guī)范的相應(yīng)研究目的的動物試驗(yàn)研究資料，如動物體內(nèi)降解代謝的研究資料等。
七、穩(wěn)定性研究
醫(yī)療器械注冊申請人需提供貨架有效期、使用穩(wěn)定性、運(yùn)輸穩(wěn)定性研究資料。
貨架有效期驗(yàn)證資料可參照《無源植入性醫(yī)療器械穩(wěn)定性研究指導(dǎo)原則》提供，一般包括器械自身性能測試和包裝系統(tǒng)性能測試兩個方面。對于不同包裝形式的產(chǎn)品需考慮分別提供驗(yàn)證資料。整形美容用重組人源化膠原蛋白注射材料的產(chǎn)品性能測試建議在實(shí)時老化條件下開展，申請人需根據(jù)產(chǎn)品的實(shí)際運(yùn)輸和儲存條件確定適當(dāng)?shù)臏囟?、濕度、光照等條件。若產(chǎn)品運(yùn)輸過程中器械性能可能發(fā)生變化，進(jìn)而影響產(chǎn)品貨架有效期，建議合并模擬運(yùn)輸及實(shí)時老化存放后開展產(chǎn)品的性能穩(wěn)定性研究。